离子通道阅读器
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ICR12000
产品介绍

Aurora公司独有的离子通道阅读器系列(Ion Channel Reader, 简称ICR), 通过精准检测细胞内离子流运动情况,结合本身专利微量分析以及检测技术,达到对离子通道与离子转运蛋白活性分析以及筛选需要。

ICR能对进出细胞的目标离子流进行精准定量,通过检测细胞内(外)的目标离子浓度,从而得出目标离子通道与转运蛋白的活性分析。本方法适用于电压门控和配体门控型离子通道研究,以及离子泵、共转运体等离子转运蛋白研究,甚至是传统膜片钳技术难以研究的电中性离子转运蛋白。所以ICR技术可作为传统膜片钳额外的补偿研究手段,帮助研究学者加速离子通道与转运蛋白靶点相关疾病研究,以及治疗与预防药物的开发。

另外,ICR方法已被实验验证与多种离子通道研究方法数据吻合,能很好地反映药物对离子通道和转运蛋白作用效果,可作为高校研究机构的基础研究之用,也可以作为相应靶点药物研发的初级和二级筛选,以及药物安全性评价筛选用途。


特征优势
灵敏度高: 
0.05mg/L (0.05ppm)

适合微量测试:
100 mL  ~5% CV  50mL    ≤10% 
CV能使用96孔板及384孔板装载样品 
大数据: 
ICR 8000  能产生5000个数据点/天

测试成本低:
ICR 8000  测试成本约$0.08/数据 
ICR能快速、高通量检测离子流变化,检测效率高,实验结果不受个体差异影响,可作为实验的初筛,然后用膜片钳进行微观的研究,验证

应用

ICR方法主要是利用示踪离子进出细胞情况进行分析(Ion Flux)。实验设计可针对不同的离子通道和转运蛋白家族,选择恰当的示踪离子,具体可根据情况进行优化。以钾离子通道研究为例,通常使用与钾离子大小、电荷以及渗透性相似的铷离子(Rubidium)作为示踪离子。首先在培养好的细胞中加入高浓度的Rb+缓冲液,合适条件下培养一段时间令Rb+充分进入到细胞内。然后洗涤缓冲液清洗细胞,以除去细胞外富余的Rb+。 随后把需要研究的化合物按所需要浓度,与洗涤缓冲液一起加入细胞共孵育。最后打开离子通道,让细胞内的Rb+析出。对于电压门控型离子通道,可以通过加入去极化的缓冲液迫使离子通道打开,而配体门控型离子通道则需要相应的配体来打开。实验最后分别收集细胞外液和细胞裂解液,通过ICR检测Rb+浓度,将细胞外液Rb+浓度与总Rb+浓度(细胞外液加上细胞裂解液)作比值,得出Rb+流出效率,根据不同实验组浓度拟合IC50 曲线,从而得到研究化合物对离子通道的影响效果。由于最后采用比值方法,可以消除孔之间的细胞密度以及Rb+加载效率的差异。



离子流分析(Ion Flux)方法并不仅仅限于研究钾通道。可以根据研究的膜通道蛋白类型选择其他适合的示踪离子,如Ag+, Li+, Ca2+以及其他离子。


技术参数
处理通量
高达60000数据点/天
最低进样量
20μL
仪器尺寸(cm)
H120×W95×D37
灵敏度
检出限0.05ppm
精确度
<5%CV